吸附柱(吸附柱图片)

食品包装机 8个月前 (07-20)

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利用吸附柱纯化DNA的原理是什么?

看了楼上一些回答,也是学生命类的吧?

专一性的吸附柱用的是和基因探针一样的原理,人工合成待纯化的DNA的一端一定长度序列的反义链,并加到吸附柱上,当混合物经过时,需要分离的DNA分子与柱上的探针结合,被留下,其余的通过。

这样的离心吸附柱可以高效、专一地与DNA片段结合,同时最大限度除去蛋白质、离子及引物小片段等杂质。

这样将寡核苷酸片断结合到柱上,可回收50 bp-50 kb DNA片段。适用于 DNA溶液中只有单一DNA片段或溶液中所有DNA片段都需同时回收的情况。

非专一性的和楼上说的差不多。

纯化柱是表面偶联有二乙胺乙醇(DEAE)的亲水性树脂.DNA纯化原理为DNA磷酸基带负电荷, DEAE带正电荷, DNA可以在0.1~1.4 mol.L-1的相当大的盐浓度范围内仍与DEAE 结合, 当低盐QBT溶液平衡纯化柱后, 即可加样, 用中等盐浓度的QC洗去RNA和其他杂质, 最后用高盐浓度的QF将DNA洗脱下来。

由于传统的离子交换范围仅在0.4 mol.L-1以内, 使杂质和DNA 洗脱范围十分接近, 难于达到满意的纯化效果. 但该柱一经使用, 6h后纯化效力即开始下降。估计可能得原因有二, 一是树脂表面亲水性强, 极易吸附蛋白, 糖类, RNA等水容物, 从而使原装柱经几次循环后吸附过多杂质, 影响了DEAE吸附DNA的能力, 同时杂质阻塞树脂间隙, 使液体流过柱子的速度明显变慢, 二是DEAE与树脂的偶联并不十分稳定, 在一经使用后的液体环境中,容易逐步解离.

什么是吸附柱?吸附柱按什么分类?吸附柱的作用是什么?

吸附阴或阳离子的一种装置,按里面所装的树脂分类,也有按柱的形式分类

吸附柱法提取比沉淀法提取DNA的优势有哪些

有如下区别:

吸附柱法是纳米科技与生物技术的完美结合,具有其他DNA提取方法无法比拟的优势,主要体现在:a.能够实现自动化、高通量操作,配合96孔的核酸自动提取仪,在以往做一个样品的提取时间内可同时实现对96个样品的处理,效率直接提高96倍,满足了当前生物学高通量操作的要求,使得在大规模疫情爆发时能够进行快速筛查原因,这个优点是其他方法难以赶超的。b.操作简单、用时短,整个提取流程只有裂解、结合、洗涤、洗脱四步短时间内即可完成。c.安全无毒,不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,对实验操作人员的伤害少,保护了实验人员的身体健康。d.磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。e.灵敏度高,适合法医样本等痕量DNA提取。

随着当代生物学的高速发展及核酸提取仪的大量普及,为了满足时代要求,吉恩特生物专业研制磁珠法DNA提取,并开发了多系列磁珠法DNA提取的系统化方案,为广大科研工作者提高试验效率,简化试验过程提供强有力的技术支持和产品保障,磁珠法DNA提取也将成为现代分子生物学的主流。

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