trizol在常温保存下短期内不会失效。
根据产品简介说明:Trizol是可以在常温环境下稳定保存12个月,但建议在2-8摄氏度避光保存,以保证产品的最佳性能。Trizol是一种新型的用于细胞或组织的总RNA提取试剂。
如果是在样品加入trizol混匀后,要在-70摄氏度保存2-4周,如果需要长期保存,应置于超低温冰箱中保存。
注意事项:trizol是强腐蚀性物质,在操作实验时,要穿戴实验服和一次性手套,请勿直接接触皮肤或吞咽,以免灼伤,如接触皮肤应立即用洗涤剂和大量生理盐水进行冲洗,忌用乙醇擦洗,否则会加重灼伤。
TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。
1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。
2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。
扩展资料:
使用TRIzol的注意事项:
1、在匀化后和加入氯仿之前,样品可以在–60—–70°C保存至少一个月。RNA沉淀(步骤4,RNA洗脱)溶于75%的乙醇在2—8°C至少可以保存一周,在–5—–20°C下至少可保存一年。
2、从少量的组织(1—10 mg)或细胞(102—104)中分离RNA 样品:往组织或细胞中加入800 micro;l TRIZOL。待样品裂解后,加入氯仿并进行步骤2中的抽提操作。
3、台式离心机最大能达到2,600×g的离心力,如果将离心时间延长到30-60分钟可以满足步骤2和步骤3中的操作。
参考资料来源:百度百科-TRIZOL
参考资料来源:百度百科-苯酚
Trizol作用原理:
在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。
水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
扩展资料
RNA和DNA一样,也是由各种核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链,但与DNA有一系列差异。
1、在化学组成方面,RNA含核糖而不含脱氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每个tNA分子含有一个胸腺嘧啶,这是在RNA链合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少数DNA含有少量核糖,但这些个别的例外并不能以此否定两类核酸组成上的差异。
2、RNA一级结构的概念虽与DNA相同.但其基本结构单位是核糖核苷酸而不是脱氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一级结构中没有DNA那样复杂的顺序组织。
3、绝大多数RNA为单链分子,单链可自身折迭形成发夹(hairpin)样结构而有局部双螺旋结构的特征,这是各种RAN空间结构的共同特征。RNA局部双螺旋结构中碱基互补配对规律是A对U和G对C。由于RNA分子内部不能全面形成碱基配对,故其碱基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA碱基比例的 Chargaff规律。
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